| 兰艳丽,刘韵.光动力学处理对宫颈癌细胞的miRNA的影响[J].安徽医药,2015,19(12):2321-2325. |
| 光动力学处理对宫颈癌细胞的miRNA的影响 |
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| 投稿时间：2015-05-04 |
| DOI： |
| 中文关键词: 光动力疗法 小分子RNA 细胞凋亡 HeLa细胞 5氨基乙酰丙酸 |
| 英文关键词: |
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| 中文摘要: |
| 目的 研究光动力学(PDT)处理对宫颈癌细胞的miRNA的影响。方法 将HeLa细胞接种到黑色透明底的96孔微Optilux板(1×10 4细胞/孔)。24 h后,当细胞附着在培养板上,除去培养基,并将培养物在磷酸盐缓冲盐溶液(PBS,pH 7.4)中洗涤3次,进行不同浓度的光敏剂PDT处理。评价PDT对HeLa细胞活力影响,并进行细胞计数,以评估其对PDT灵敏度。激光照射1 h后,所有HeLa细胞的总细胞RNA经Quick Gene RNA细胞培养试剂盒提取后,进行DNA酶处理,使用大容量cDNA逆转录试剂盒进行逆转录(RT)。实时PCR定量测定凋亡相关的miRNA(MIR-7,miR-148a,miR-204,miR-210,miR-216和miR-296的表达水平。结果 PDT处理1 h后,与未做任何干预处理的对照组比较,HeLa细胞存活率显著降低至78％。PDT处理24 h后,HeLa细胞全部死亡。此外,PDT处理1 h后,HeLa细胞内聚半胱天冬酶活性,显著增高。另外,PDT处理1 h后,miR-210和miR-296的表达水平显著高于对照组。然而,其他miRNA的表达水平包括miR-7,miR-148a,miR-204和miR-216与对照组无差异。结论 PDT处理宫颈癌细胞后,miRNA表达水平不同,miR-210和miR-296的表达水平最高,可以作为宫颈癌PDT疗效的标记物。 |
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