| 王铭,司小萌,陈欢,等.罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制[J].安徽医药,2020,24(12):2347-2351. |
| 罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制 |
| Ropivacaine affects proliferation and apoptosis of osteosarcoma cells by down?regulating miR?199b?5p expression |
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| DOI：10.3969/j.issn.1009?6469.2020.12.004 |
| 中文关键词: 骨肉瘤 罗哌卡因 细胞周期蛋白 D1 基因， bcl?1 miR?199b?5p 细胞增殖 凋亡 |
| 英文关键词: Osteosarcoma Ropivacaine Cyclin D1 Genes,bcl?1 miR?199b?5p Cell proliferation Apoptosis |
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| 中文摘要: |
| 目的探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养骨肉瘤细胞 MG63，分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、 anti?miR?NC组、 anti?miR?199b?5p组、中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组和中剂量罗哌卡因 +miR?NC组。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞凋亡，白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、 P21、B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白蛋(Bax)表达水平，实时荧光定量逆转录 PCR(RT?qPCR)检测细胞中 miR?199b?5p表达水平。结果与对照组比较，低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组 MG63细胞增殖能力［(0.88±0.08)、(0.49±0.05)、(0.34±0.03)比(0.92±0.09)］、 Cyclin D1蛋白［(0.85±0.08)、(0.66±0.06)、(0.41±0.04)比(0.95±0.09)］表达降低(P＜0.05)，而 P21［(0.18±0.02)、(0.37±0.04)、(0.71±0.07)比(0.14±0.01)］蛋白表达升高(P＜0.05)中剂量罗哌卡因组 Bcl?2蛋白［(0.20±0.02)比(0.76±0.07)］及 miR?199b?5p［(0.13±0.01)比(0.82±0.08)］的表达降低(P＜0.05)，而，MG63细胞凋亡率［(23.51±2.42)%比(7.66±0.75)%］和 Bax蛋白［(0.89±0.09)比(0.28±0.03)］表达升高(P＜0.05)。与 anti?miR?NC组比较， anti?miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.64±0.06)比(0.98±0.09)］及 Cyclin D1蛋白［(0.40±0.04)比(0.95±0.09)］和 Bcl?2蛋白［(0.36±0.03)比(0.76±0.07)］的表达降低(P＜0.05)，而 MG63细胞凋亡率［(19.56±1.58)%比(7.66±0.75)%］及 P21［(0.53±0.05)比(0.14±0.01)］和 Bax［(0.71±0.07)比(0.28±0.03)］的蛋白表达升高(P＜0.05)。与中剂量罗哌卡因 +miR?NC组比较，中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.58±0.06)比(0.36±0.03)］及 Cyclin D1蛋白［(0.71±0.07)比(0.40±0.04)］和 Bcl?2蛋白［(0.53±0.05)比(0.21±0.02)］的表达升高(P＜0.05)，而 MG63细胞凋亡率［(12.68±1.23)%比(23.35±2.34)%］及 P21［(0.37±0.03)比(0.72±0.07)］和 Bax［(0.57±0.06)比(0.88±0.09)］的蛋白表达降低(P＜0.05)。结论罗哌卡因可能通过下调 miR?199b?5p降低了骨肉瘤细胞的增殖，并促进了其凋亡。 |
| 英文摘要: |
| Objective To investigate the effect of ropivacaine on the proliferation and apoptosis of osteosarcoma cell line MG63 and its mechanism.Methods Osteosarcoma MG63 cells were cultured in vitro and assigned into control group，low?dose ropiva? caine group，medium?dose ropivacaine group，high?dose ropivacaine group，anti?miR?NC group，anti?miR?199b?5p group，medium? dose ropivacaine+miR?199b?5p group and medium?dose ropivacaine+miR?NC group.MTT method was used to detect cell prolifera?tion；flow cytometry was used to detect cell apoptosis；Western Blot was used to detect the protein expression level of CyclinD1， P21，Bcl?2 and Bax；RT?qPCR was used to detect the expression level of miR?199b?5p in cells.Results Compared with the control group，the proliferation ability of MG63 cells in the low?dose ropivacaine group，medium?dose ropivacaine group，and high?dose ropi? vacaine group［(0.88±0.08)，(0.49±0.05)，(0.34±0.03)vs.(0.92±0.09)］and the protein expression of Cyclin D1［(0.85±0.08),(0.66±0.06)，(0.41±0.04)vs.(0.95±0.09)］decreased(P＜0.05)，while the protein expression of P21［(0.18±0.02)(0.37±0.04)， |
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